Fundamento: La hepatitis B es un importante problema de salud a nivel mundial. Según la OMS, se estima que 2 000 millones de personas han sido infectadas y más de 360 millones son portadores crónicos. El diagnóstico de la hepatitis B se ha realizado a través de técnicas serológicas para detectar diferentes marcadores virales. Objetivo: Determinar el comportamiento de los marcadores serológicos del virus de la hepatitis B (VHB) en estudiantes de la Escuela Latinoamericana de Medicina durante el primer trimestre de 2017. Método: Se estudiaron 762  muestras clínicas. Para el diagnóstico se utilizaron los estuches de reactivos UltramicroELISA para detectar anti-HBc total, HBsAg y su prueba confirmatoria,  anticuerpos de tipo IgM contra el antígeno core y anticuerpos contra el antígeno de superficie, todos producidos por el Centro de Inmunoensayo de La Habana, Cuba. Resultados: Se encontró prevalencia de infección aguda por VHB en el 0,91 % de la población, infección resuelta en el 2,49 %, infección crónica en el 0,65 % y ventana inmunológica en el 1,18 %, lo cual equivale a 5,25 % (n=40) de estudiantes universitarios que han tenido contacto previo con el VHB. Por otra parte, en 94,75 % (n=722) no se identificaron marcadores virales con las pruebas serológicas empleadas, definidos como susceptibles. La positividad para el estadio de infección aguda  fue mayor en hombres (57 %), mientras que para el estadio de infección crónica fue mayor en mujeres (60 %).  Conclusiones: Los resultados obtenidos demuestran la posibilidad de incrementar la eficiencia en el diagnóstico y la vigilancia epidemiológica del VHB.